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苦惱番木瓜無法長期儲存,用對1-MCP就能解決煩惱

作者:柯靜aa

番木瓜果實能增強免疫力、抗氧化等,原因在于類胡蘿蔔素在發揮功效,免疫系統受類胡蘿蔔素刺激後,能使人體免疫力提高,抑制活性氧活性,減少癌細胞的形成,胡蘿蔔素可以轉化為維生素A,支援人體健全的免疫系統,番木瓜中的鋅微量元素存在于100 多種酶的活性中心,是人體免疫系統和防禦功能不可或缺的。

但是番木瓜是典型的呼吸躍變型果實,采後極易成熟軟化,腐爛變質,1-MCP是一種新型的果蔬保鮮劑,通過和乙烯競争受體而達到保鮮效果,番木瓜果實經1-MCP處理後,果實不能正常軟化,且風味變淡,食之如胡蘿蔔,出現“橡皮化”,缺少了果實正常的口感和風味。

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1-MCP對果實硬度的影響

在貯藏過程中番木瓜果實的硬度不斷下降,其中CK組和ETH 組在前5d 急劇下降,分别從0.9kg*cm下降到0.65kg*cm”和0.56kg*cm”,而1-MCP 處理組果實硬度幾乎沒有變化,整個貯藏期果實的硬度僅下降了9.4%,處理間差異極顯著,至貯藏後期(30d),CK 組合 ETH 組果實硬度已下降至0.56 和 0.48kg*cm”,而 1-MCP組果實的硬度仍然保持在0.85kg*cm”,差異非常顯著(P<0.01),表明1-MCP處理能極顯著的保持番木瓜果實硬度,抑制果實的軟化。

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在貯藏過程中,PG酶活性呈現先升高再下降的峰型變化趨勢(見圖3),但不同處理的果實表現不同。1-MCP 和 ETH 處理的果實在第 5d達到活性高峰,而CK組果實到底 15d才達到高峰。從活性峰值來看,1-MCP 和ETH 處理果實的PG峰值遠遠高于CK果實,兩者分别比CK果實高9.22pmol·hg和12.60umol-hg,處理間差異極顯著(P<0.01),說明1-MCP 和ETH 處理番木瓜果實對貯藏前期PG酶活性的提高具有顯著的促進作用。在采後中後期時,三組處理的PG酶活性差異不大,說明1-MCP對PG酶活性的影響在前期明顯,中後期變弱。

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CK、ETH和 1-MCP 處理果實的 CX 活性高峰分别出現在第 20、10和 5d,而且 1-MCP 處理果實的活性峰值最高,分别比ETH和CK果實高5.92wmol-hg和9.60umol-h'"g',處理間差異極顯著(P<0.01)。表明1-MCP和ETH處理對番木瓜果實CX酶活性的提高具有一定的促進作用,尤以1-MCP的促進作用最顯著。這種顯著作用在前期比較明顯,10 天後 1-MCP對CX酶活性呈抑制效果,但抑制效果不是很明顯。

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采後番木瓜果實的 PME 酶活性呈現峰型變化的趨勢,CK、ETH和 1-MCP三種處理果實的 PME 酶活性高峰分别出現在 20、20和 25d,三者的活性峰值分别為 48、28和 38U·hg’,三者間差異顯著(P0.01):從圖4還可以看出,貯藏前期,1-MCP組果實的PME酶活性遠遠高于CK和ETH處理果實(P<0.01),說明貯藏前期1-MCP對PME活性有明顯的促進作用。

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在貯藏前期(第10d時),1-MCP處理果實的内切葡聚糖酶活性分别比CK組和ETH組果實低2.484wmol·hg'和6.948umol·h'g',三者間差異極顯著(P<0.01)。CK、ETH和1-MCP處理果實的内切葡聚糖酶活性高峰分别出現在第15、15 和 20d,而且 1-MCP 處理果實的活性峰值最低,但差異不顯著,說明在貯藏前期,1-MCP 對于内切葡聚糖酶活性具有顯著抑制作用,同時可以延遲内切葡聚糖酶活性高峰的出現,對于抑制果實軟化具有一定作用。在第20d,1-MCP處理果實的活性達到最高,并且超過 CK和ETH處理組,說明1-MCP對處理果實的内切葡聚糖酶活性的抑制效果消失。

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1-MCP 對内切木聚糖酶活性的影響

CK 和ETH 處理果實的内切木聚糖酶活性呈現峰型變化趨勢1-MCP 處理後,果實的内切木聚糖酶活性則呈現緩慢變化的趨勢:CK和ETH 處理果實的内切木聚糖酶活性分别在第10d和第 5d達到高峰,峰值分别為12和19mmol-hg而1-MCP處理果實的酶活性基本維持在5umol-hg,說明乙烯利處理能夠較顯著的提高内切木聚糖酶活性,而1-MCP處理則極顯著的抑制了内切木聚糖酶活性的提高,在保持果實硬度上起到了顯著的作用。

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番木瓜果實經過 1-MCP 處理後,對細胞壁代謝相關類,如PG酶、PME 酶、CX 酶、内切木聚糖酶、内切葡聚糖酶、β-半乳糖苷酶等都産生了一定影響但對各類酶活性的影響具有差異。1-MCP處理後,PG酶、PME酶、CX酶活性不斷升高,出現較高的活性峰值;而1-MCP處理後,在貯藏前期内切葡聚糖酶和B-半乳糖苷酶活性受到了顯著的抑制。

在整個貯藏期都極顯著的抑制了内切木聚糖酶活性的上升,說明 1-MCP 使果實保持較高硬度,不能正常軟化,發生“橡皮化現象”與較低的内切木聚糖酶、内切葡聚糖酶和β-半乳糖苷酶活性有重要關系,尤與内切木聚糖酶活性的穩定變化關系最為密切。

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番木瓜果實經過 1-MCP 處理後,對細胞壁代謝相關酶類,如PG酶、PME 、CX酶、内切木聚糖酶、内切葡聚糖酶、β-半乳糖苷酶等都産生了一定影響,但對各類酶活性的影響具有差異。1-MCP 處理後,PG酶、PME酶、CX酶活性不斷升高,出現較高的活性峰值,這與正常軟化的番木瓜果實及與1-MCP在其他果實上對酶活性的影響作用是一緻的。

而 1-MCP處理後,在貯藏前期内切葡聚糖酶和 B-半乳糖苷酶活性受到了顯著的抑制。在整個貯藏期都極顯著的抑制了内切木聚糖酶活性的上升,說明1-MCP使果實保持較高硬度,不能正常軟化,發生“橡皮化現象”與較低的内切木聚糖酶、内切葡聚糖酶和 β-半乳糖苷酶活性有重要關系,尤與内切木聚糖酶活性的穩定變化關系最為密切,1-MCP 與番木瓜果實貯藏品質的關系、采後軟化發生的機制還需要從細胞水準、分子水準等多方面進行更加深入的研究和探讨。

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RNA瓊脂糖凝膠電泳有明顯的三條帶,說明電泳圖是較為完整的,這三條帶至上而下依次為28S、18S和5S條帶。28S主要是mRNA,18S主要是rRNA,5S裡面含有較多的降解 RNA。其中最下面的5S條帶與上面的兩個條帶相比顔色暗淡,說明提取的 RNA 沒有發生過多的降解。再看28S和18S條帶,顔色明亮、清晰,條帶的邊緣清晰,且 28S條帶比18S條帶更為明亮,說明RNA提取品質效果較好。

核酸分子中含有堿基使核酸在 260nm下有最大吸收。紫外吸收是嘌呤環和啶環的共轭雙鍵系統所具有的性質,含有嘌呤和嘧啶的物質,不論是核苷、核苷酸或核酸都有吸收紫外光的特性。80、320、230、260nm下的吸光度分别代表了核酸、背景(溶液渾濁度)、鹽濃度和蛋白等有機物的值。當R<1.8時,溶液中蛋白或者時其他有機物的污染比較明顯;當R>1.82時,說明RNA 中蛋白或者其他有機物的污染是可以容忍的;當R>2.2時,說明RNA 已經水解成單核酸了。看表1,可知本實驗提取的RNA 樣品OD260/280值都在1.82和2.2之間,屬于可用範圍,且樣品的濃度和總量達到了測序的标準。

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對照、乙烯處理和1-MCP處理對CX;基因的轉錄組水準影響不同,乙烯處理組和 CK 果實的 CX;基因的轉錄水準與1-MCP 處理組在第 9d 時差異最顯著,而且CK果實的 CX;基因在第 15天時仍然維持在較高水準,而在番木瓜果實采後貯藏前中期,1-MCP處理果實的CX:基因的轉錄水準一直維持在較低水準,在第 9d時,1-MCP處理組的CX;基因的轉錄水準比 CK 和 ETH 處理組分别低12.38和 20.31,處理間差異極顯著(P<0.01),說明 1-MCP處理具有顯著地抑制CX;基因轉錄的作用。

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結語

1-MCP處理後,番木瓜的果實硬度呈現緩慢變化的趨勢,采收初期(0d)和貯藏末期(第35d)的果實硬度分别為0.91kgcm和0.78kgcm”,整個貯藏期内果實硬度僅下降了 14.29%。1-MCP 對細胞壁代謝相關酶類産生了重要影響,但對各類酶活性的影響具有差異:PG 酶、PME 酶、CX酶活性不斷升高,并呈現峰型變化的趨勢:PG酶、PME 酶、CX酶的活性峰值分别出現在采後第 5d,第 25d和第 5d。

但是,1-MCP 處理卻大大抑制了内切葡聚糖酶和 B-半乳糖苷酶的活性,在貯藏第 10d 時,内切葡聚糖酶活性和 B-半乳糖苷酶的活性分别比CK果實低6.35和28.46umol·h!·g(P<0.01)。而且,内切木聚糖酶活性在整個貯藏期都表現在最低水準,處理間差異極顯著,番木瓜果實所表現的較高的果肉硬度、果實的非正常軟化,可能與整個貯藏期内内切葡聚糖酶活性、B-半乳糖苷酶的活性較低,維持了細胞壁結構的完整性、抑制了細胞壁的降解有重要關系。

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生物資訊分析表明,1-MCP處理後,PG酶、PME酶、CX、内切木聚糖酶内切葡聚糖酶、B-半乳糖苷酶基因的轉錄水準具有明顯的差異。1-MCP 處理顯著抑制了PG 基因、CX;基因、CX基因、PME;基因、内切葡聚糖酶;基因、β-半乳糖苷酶!基因、内切木聚糖酶:基因)、内切木聚糖酶2基因的轉錄水準,貯藏第9d以上基因的轉錄水準分别是166.88、2.01、153.84、36.82、19.35、416.46、8.52和 2.12,分别比CK果實低 9553.66、12.38、573.87、914.76、30.78、507.08、139.78和13.31 處理間差異極顯著(P<0.01)。